Prosiding Seminar Tahun 2001_27

PROSIDING TAHUN 2001
Seminar Hasil Penelitian Rintisan dan Bioteknologi Tanaman

Bogor,
30-31 Januari 2001
—— ————————


Studi Pengaruh Penambahan Mineral
terhadap Aktivitas Protease dari Bacillus circulans 9b3


(Sri Widowati, Lalu Sukarno, Pudji Raharto, dan Ahmad Thontowi)

 

ABSTRAK

 

Salah satu kelemahan enzim semi kasar ialah stabilitas dan aktivitasnya rendah. Berbagai cara dapat dilakukan untuk meningkatkan stabilitas dan aktivitas enzim salah satunya yaitu pemberian aditif berupa mineral atau ion logam. Cara lain untuk meningkatkan produksi dan aktivitas enzim yaitu melalui teknik molekuler. Pengaruh ion logam terhadap aktivitas protease bervariasi tergantung jenis logam dan konsentrasinya. Tujuan dari penelitian ini ialah mempelajari pengaruh beberapa jenis mineral terhadap aktivitas protease, dan mengisolasi kromosom dan plasmid B. circulans 9b3. Jenis mineral divalen yang ditambahkan, yaitu MgSO4, MnSO4, ZnSO4, CaCl2, dan FeSO4 dengan konsentrasi masing-masing 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; dan 2,5 mM. Pengaruh penambahan mineral terhadap aktivitas protease dihitung dalam persen dibandingkan dengan aktivitas protease kontrol (tanpa mineral) yang dianggap 100%. Isolasi kromosom dilakukan dengan metode Pitcher, sedangkan plasmid diisolasi dengan metode alkalin lisis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada semua tingkat konsentrasi, ion logam Mn dan Ca dapat meningkatkan aktivitas protease. Kenaikan aktivitas tertinggi dicapai pada konsentrasi 1,5 mM, berturut-turut untuk penambahan Ca dan Mn, yaitu 5 dan 31%. Pada semua tingkat konsentrasi, ion Mg2+ menurunkan aktivitas protease, sedangkan ion logam lain pengaruhnya tidak menentu. Bakteri B. circulans 9b3 mempunyai kromosom berukuran sekitar 23 kb, dan mengandung 2 buah plasmid. Hasil isolasi kromosom dan plasmid ini akan d-teruskan dengan pemotongan menggunakan enzim restriksi pada penelitian selanjutnya.


Kata kunci: Mineral, protease, genom, Bacillus circulans 9b3

ABSTRACT

One powerlessness of the enzym storage is low stabilities and activities. Several methods are usually used to enhance stabilization and activity, such as minerals or metal ion addition. Other method to increase production and enzyme activity is molecular technique. Effect mineral addition toward enzyme activity is various depending on the kind and mineral concentration. The aims of this research are to study the minerals effect to protease activity, and to isolate of chromosome and plasmid from B. circulans 9b3. Some divalen minerals added are MgSO4, MnSO4, ZnSO4, CaCl2, and FeSO4 in several concentrations i.e. 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; and 2.5 mM). Effect of mineral addition to protease activity is calculated as percent to protease control (100%). Pitcher method was used for chromosome isolation, whereas alkalin lysis was used for plasmid isolation. Results showed that Mn and Ca ions have increase of protease activity in all concentration level. The highest activity was reached at 1.5 mM of mineral Ca and Mn addition, i.e. 5 and 31%, respectively. At all concentration level, Mg have decreased the enzyme activity, while other ions addition have uncertaimed effect. B. circulans 9b3 bacteria has approximately 23 kb chromosomal DNA, and contain two plasmids. This research will be continued to digest the genomic DNA with restriction enzimes.

Key words: Mineral, protease, genome, Bacillus ciculans 9b3

Download artikel lengkap (PDF)



wso shell indoXploit shell wso shell hacklink hacklink satışı hacklink satış deface mirror wso shell